Kontaminované doplňky výživy?!

Poslední tři, čtyři roky jsou hlášeny sporné případy pozitivních sportovců. Někteří z nich nařčení z použití jakýchkoli zakázaných látek vehementně odmítají. Svá tvrzení dokládají rozborem od akreditovaných zahraničních laboratoří s poukazem na konkrétní doplňky stravy, které v přípravě použili. Rozbory prokazují, že některé suplementy jsou ilegálně kontaminovány anabolickými hormony či prohormony.

Sportovcům byl v moči nalezen metabolit nandrolonu nebo prohoromonů nandrolonu - 19-norandrosteron. Pokud je nález 19-norandrosteronu vyšší než 2 ng/ml moče, je sportovec považován za pozitivního. Erudovaní vědci před několika lety zjistili, že v těle může vznikat určité malé množství 19-norandrosteronu a proto byl stanoven limit 2 ng/ml moče u mužů, protože se jedná o látku v těle se tvořící. Ženy mají limit 5 ng/ml. Ne všichni sportovci produkují tento metabolit. Někteří mužští jedinci tvoří od 0.2-1.2 ng/ml moče 19-norandrosteronu.
Byly také studovány důsledky intenzivní námahy. Nalezené koncentrace 19-norandrosteronu se po námaze zvýšily až 3 krát k bazálním hodnotám. Některé těhotné ženy vykazovaly hladiny 19-norandrosteronu od 2 do 16/ng ml. Pravdou je, že riziko falešně pozitivního dopingu, díky vlastní vyšší tvorbě 19-norandrosteronu je 1:10 000. Přesto se většina vědeckých pracovišť kloní k rozsáhlejší studii se zahrnutím normální mužské populace, včetně atletů během tréninku a s přihlédnutím k aplikaci legálních doplňků výživy. Dále je nutné přezkoumat ne příliš známý efekt fyziologické stimulace biosyntézy 19-norsteroidů v organismu, aby bylo možné posoudit, zda mohou být stanovené limity určující pozitivní doping překročeny jinou, než zakázanou cestou.

Doba zjistitelnosti

Ve většině případů je nález 19-norandrosteronu spojen s aplikací injekčního anabolického steroidu 19-nortestosteronu-nandrolonu. Dvě nejznámější formy Nandrolon dekanoát a Nandrolon fenylpropionát jsou depotní formy anabolického steroidu. Pozitivní nález u nandrolon dekanonátu může být zjištěn 18 i více měsíců, u fenylpropionátu 6 a více měsíců, po poslední aplikaci. Majoritním metabolitem je právě zmíněny 19-norandrosteron-glukuronid (v malé míře i sulfát dále 19-noretiocholanolon-glukuronid) v malé míře i sulfát, norepiandrosteron, 16 alfa-hydroxy-norandrosteron.
Existují oční kapky Keratyl, obsahující nadrolon natrium sulfát. Orálně podaný 19-nortestosteron-nadrolon je v podstatě neúčinný, ale metabolizuje se stejně, ovšem značně rychleji než injekční aplikace.

Velmi často se zapomíná na skupinu „takzvaných 19-norsteroidů“, legálně se prodávající v USA, které jsou od roku 1998 na seznamu zakázaných látek. Jedná se především o tyto látky (níže uvedené steroidy se používají orálně-ústy):
19-4-Norandrostendion
19-4-Norandrostendiol
19-5-Norandrostendion
19-5-Norandrostendiol

Po orální aplikaci 50-100mg 19-norprohormonů se v moči nalézá masivní množství 19-norandrosteronu a řada dalších metabolitů. Znamená to, že pozitivní nález má sportovec i po orálním požití 19-norprohormonů, nebo kontaminovaných suplementech obsahující 19-norprohormony či nandrolon.

Pozitivní nálezy v doplňcích výživy

V roce 1999 Prof. Schanzer, H. Geyr a kolektiv (Institut of Biochemistry, German Sport University, Cologne) ve své první studii The Analysis of Nutritional Supplements for Anabolic-Androgenic Steroids odhalil kontaminaci 3 doplňků stravy. Analýza byla provedena ze 3 balení od každého druhu:
Vzorek a: Chrysin
Vzorek b: Tribulus Terrestris
Vzorek c: Guarana

Zde jsou výsledky:
Ve výrobku obsahujícím Chrysin byl nalezen: 4-Androstendion,19-4-Norandrostendion,19-4-Norandrostendiol.
Ve výrobku obsahujícím Tribulus Terrestris byl nalezen: 4-Androstendion, 5-Androstendiol, 4-Androstendiol, 19-4-Norandrostendion, 19-4-Norandrostendiol.
Ve výrobku obsahujícím Guaranu byl nalezen: 4-Androstendion, 5-Androstendiol, 19-4-Norandrostendion, testosteron!!
V jedné kapsli se nalézalo množství od 0.04 ug – 1336 ug 19-norsteroidů. Po jednotlivé aplikaci doplňků stravy 1 kapsle (7 dobrovolníkům) se v moči nalézal 19-norandrosteron v těchto hodnotách: 3.8 ng/ml, 5.5 ng/ml,16 ng/ml, 34 ng/ml,157 ng/ml, 360 ng/ml a 623 ng/ml.
Ta samá laboratoř provedla v roce 2000-2001 rozsáhlou studii a podrobila 634 doplňků stravy z 13 států od 215 dodavatelů důkladné analýze na přítomnost anabolicko-androgenních steroidů. Na žádném výrobku nebylo deklarováno, že obsahuje hormony či prohormony.

95 suplementů obsahovalo níže uvedené látky:
DHEA
19-4-Norandrostendiol
19-4-Norandrostendion
19-5-Norandrostendiol
19-5-Norandrostendion
19-nortestosteron-nandrolon
4-Androstendion
4-Androstendiol
5-Androstendiol
5-Androstendion
Testosteron
Některé výrobky obsahovaly 2-4 prohormony, prvenství patřilo kreatinu monohydrát, který obsahoval 7 prohormonů + testosteron.

Je třeba upozornit na to, že množství prohormonů v jednotlivých suplementech v kapslích (tabletách) se nalézalo od 0.01ug - 6000 ug a nejvyšší počet byl v rozmezí 10-100 ug. Zarážející je i to, že jednotlivé kapsle ze stejné šarže u výrobku obsahující Tribulus Terrestris vykazovaly velké rozdíly v obsahu prohormonů.
kapsle č. 1/šarže 1 0.3 ug 4-androstendion,
kapsle č. 3/šarže 1 76.3 ug 4-androstendion
Například šarže č.1 a č. 2 neobsahovaly 5-andostendiol, šarže č. 3 ano.
Je nutné upozornit, že 21 % kontaminovaných doplňků pocházelo od firem prodávající prohormony (345), než od firem (289), které tyto látky nenabízejí (9.6 %).
Bylo zjištěno, že už po podání 3.7 ug 19-Norandrostendionu se v moči po dvou hodinách může nalézat až 11.5 ng/ml 19-norandrosteronu!! Po podání ústy 100 mg 19 -4-Norandrostendionu se v 1 mililitru moče nalézá až 90 000 ng/ml 19-norandrosteronu.
50 mg nortestosteronu-nandrolonu podaný orálně způsobí nález 20 000 – 30000 ng/ml moče 19-norandrosteronu.
Existují i jiné studie, které analytickým rozborem dokazují přítomnost metandienonu, oxandrolonu, methyltestosteronu, nadrolenu a DHT ve zcela legálních potravních doplňcích. V České republice je zdokumentován případ, prokázaný analýzou, kontaminace legálního doplňku výživy, který byl schválen Hlavním hygienikem České republiky. Výživový doplněk, který byl podroben rozboru, obsahoval několik prohormonů-hormonů, které se metabolizují na výše zmíněný 19- norandrosteron. Bližší údaje nelze v tuto chvíli uvádět.

Jaká je legislativa u nás, potažmo v EU?

Pokud je známo, nikde ve světě se nemusí doplňky stravy dávat na rozbor a monitorovat obsah anabolických steroidů, prohormonů a to především z těchto důvodů:
- nebyl do určité doby předpoklad, že obsahují látky hormonální povahy.
- analýza by byla velmi finančně nákladná.
- stát ponechává odpovědnost na výrobci či dovozci.
- až na výjimky žádný stát nedisponuje laboratoří, která se rutině zaobírá analýzou steroidů v doplňcích stravy.

Laboratoř v České republice

V České ani Slovenské republice prozatím neexistovala laboratoř, která by uměla velmi kvalitně a přesně analyzovat doplňky stravy na přítomnost anabolicko-androgenních hormonů.Vybavení, které je nutné (GC-MS, LC-MS/MS) vlastní mnoho laboratoří, ale problém je nejen v analytice, ale i ve vysoké finanční náročnosti. I přes detailně popsané analytické postupy musí laboratoř mnoho měsíců nákladně „vychytávat“ analytiku, což není jednoduché. Výsledky analýz musí být definitivní a jasně reprodukovatelné. Měly by mít k dispozici vzorky doplňků stravy, které byly kontaminovány a pozitivně analyzovány u akreditovaných zahraničních laboratoří, aby si ověřili validitu vlastních rozborů. Druhou, komplikovanější, možností je nakoupit celé spektrum vzorků hormonů, prohormonů, anabolických steroidů a ty přidávat do surovin a to například do kreatinu, L-glutaminu, aminokyselin, vitaminů, proteinů, karnitinu atd. Následně tyto směsi tabletovat, kapslovat, nebo převádět do sypkých či pitných forem a do „nekonečna“ analyzovat. Nejlépe se analyzují sypké směsi, které obsahují pouze 1 deklarovanou látku jako například Kreatin monohydrát, L-glutamin, L-arginin, pyrohroznan vápenatý/draselný, karnitin tartrát, dextroza, L-ornitin,taurin atd. Následují pitné formy obsahující 1 deklarovanou látku jako například L-karnitin baze, L-arginin, taurin, atd. Velmi špatně se analyzují sypké směsi obsahující různé proteiny jako například whey protein, lactalbumin, ovoalbumin, sojový protein, mléčný protein, kaseináty v kombinaci s maltodextrinem, syrovátkou, fruktozou, kreatinem, taurinem, HCA, aminokyselinami, popřípadě s přídavkem mastných kyselin. Sypké směsi i některé tablety mohou vytvářet komplikované matrice, které se velmi náročně analyzují. Omlouvám se, ale nemá význam zde popisovat „anabázi“ analýzy: extrakce, derivatizace atd, nebo limit detekce pro prohormony a hormony.

V Evropě jsou asi 4 laboratoře, které se analýzou suplementů zabývají, respektive detekcí na anabolické steroidy, prohormony. Je známo, že Státní zemědělská a potravinářská inspekce provedla před 5-6 měsíci u některých výrobců nutraceutik odběr vzorků, které budou analyzovány na přítomnost anabolických steroidů, prohormonů. SZPI k tomuto účelu nakoupila pro zkušební laboratoř v Praze moderní vybavení. K dispozici mají GCxGC –TOF MS a LC-MS/MS,GC-MS. O profesionalitě a erudovanosti pracovníků špičkové pražské laboratoře není pochyb.

Plošné analýzy výrobků

Od roku 2006 Státní zemědělská a potravinářská inspekce bude plošně provádět analýzy doplňků stravy - potravin určených pro zvláštní výživu. Dovozce či výrobce, pokud chce mít jistotu, že výrobek má v „pořádku“, by musel analyzovat každou surovinu, každou šarži, nebo finální výrobek. Tato operace je finančně velmi nákladná a pro většinu výrobců či dovozců nedostupná. Na druhé straně musí výrobce či dovozce nést určité sankce pokud se prokáže, že jeho preparát obsahoval hormony či prohormony. Můj osobní názor je, že dvě firmy, které u nás v současné době řeší svoje „kontaminované“ suplementy, nejsou iniciátory přidávání látek hormonální povahy do svých doplňků stravy. Domnívám se, že nakoupili surovinu už kontaminovanou. Naprostá většina výrobců doplňkové stravy suroviny nakupuje od svých velkoodběratelů, zde či v zahraničí, popřípadě přímo u výrobců surovin. Finální výrobci doplňkové stravy (tedy ti, co suroviny zpracovávají do kapslí, tablet, roztoků a prášků) by byli hazardéři, aby něco podobného do svých výrobků přidávali. Jistě, vyloučit se to nedá a bohužel určité indicie svědčí o tom, že někteří zahraniční výrobci vědomě steroidy do potravních doplňků přidávají.

Proč se suroviny kontaminují?

Je třeba hned v začátku odmítnout teorii, že ke kontaminaci došlo například proto, že se špatně vyčistil přístroj na kapslování a nebo tabletování. Čistě teoreticky možné to je v USA, kde se různé prohormony legálně vyrábějí. Na druhé straně nikdo v USA legálně nevyrábí suplement s obsahem testosteronu, nadrolonu, dihydrotestosteronu, metandienonu, methyltestosteronu a přesto se v doplňcích stravy tyto steroidy vyskytují! Další nesmyslné tvrzení je to, že některé doplňky stravy, které se vyrábí z živočišných surovin (kravské mléko, kolagen, játra) obsahují zakázané látky jen proto, že skot byl vykrmován steroidy. Nikde není zmínka, že by se dobytek „dopoval“ prohormony: 19-Norsteroidy a spektrem 4/5 androstendiol/dion.

Nalezená množství a poměry prohormonů a hormonů v kapsli či tabletě ukazují na úmyslnou kontaminaci, například už prvotní surovinou. Proč? Výrobci surovin, či jiní v koloběhu distribuce, si možná bláhově myslí, že přidáním určitého malého množství prohormonů způsobí větší “metabolicko-anabolický efekt“ surovin a finální výrobek se bude lépe prodávat. Omyl, ve většině analyzovaných doplňků stravy množství prohormonů v kapsli (tabletě) je relativně nízké (mikrogramy), což nemůže mít žádaný farmakologický efekt.Výjimku tvoří například nález 5140 ug čtyř prohormonů v jedné kapsli u výrobku Guarana.

Prohormony se dávkují od 25-150 mg/den dle doporučení výrobce. Je nepravděpodobné, že by mohlo „fungovat“ něco, co je 50-500 krát slabší. Jistě i zde existují výjimky, kdy přípravek obsahoval 28.93 mg/g anabolického steroidu methandieon!! Vyroben byl v USA a dovážen do Velké Británie. Zrádnost je i v tom, že velmi málo lidí mělo přehled o metabolizaci především 19-norprohormonů. Není to ironie, tak nízké množství 3.5 mikrogramů

19-Norandrostendionu zvýší 19-norandrosteron nad povolenou hranici 2 ng/ml moče/8-11 ng/ml. A jaká je finanční stránka věci? Není pravdou, že kontaminovaný preparát by byl finančně nákladný. Při porovnání cen hormonů-prohormonů k zjišťovanému množství steroidů obsažených v 1 balení se výrobek prodraží maximálně o 8-20 korun.

Shrnutí

1) Není pochyb o tom, že některé doplňky výživy jsou kontaminovány steroidy a tyto látky nejsou deklarovány na etiketě. Průkazem jsou vysoce sofistikované analýzy akreditovaných antidopingových laboratoří. Spojovat validitu antidopingových testů s analýzou suplementů není opodstatněné, průkaznost steroidů v suplementech je nad vší pochybnost.
Z hlediska antidopingových testů bylo oznámeno, že ve výjimečných případech se mohou v moči sportovce, která je pravděpodobně mikrobiálně kontaminována (či působením enzymatické aktivity moče), objevit malá množství sledovaných endogenních steroidů:
19-nrandrosteron, 19-noretiocholanolon. To nemá nic společného s pomyslnou „špatnou“ metodou rozborů a výslednou interpretací.

2) Všechny antidopingové laboratoře splňují nejpřísnější kritéria pro akreditaci, správnou laboratorní praxi, povinné přístrojové vybavení, kontrolní analýzy vzorků. Vědečtí pracovníci akreditovaných dopingových laboratoří nemají nejmenší zájem poškodit sportovce či jakýmkoliv způsobem „provést“ analýzu doplňků stravy tak, aby byl „falešně pozitivní“ či „falešně negativní“. Navíc se mohou zúčastnit „rozboru“ přímo v dopingové laboratoři, nebo zmocnit nezávislého analytického chemika k dohledu nad analýzou.

3) V EU žádná země oficiálně nekontroluje přítomnost steroidů v doplňcích výživy, výjimku tvoří Česká republika. Výjimku tvoří veterináři, existuje u nás akreditovaná laboratoř, která analyzuje z biologických materiálů a moče přítomnost na19-nortestosteronu, testosteronu, zeranolu, trenbolonu, methyltestosteronu. V žádném případě neznamená, že jediným viníkem kontaminovaného doplňku stravy je výrobce, který si nechává zpracovávat či přímo zpracovává suroviny do tablet, kapslí, tekutých a práškových forem.Výrobce i dovozce musí nést zodpovědnost za kontaminovaný doplněk přesto, že se ničeho vědomě nedopustil.

4) Je velmi pravděpodobné, že jednotlivé suroviny mohou být „obohacovány“ o různé druhy steroidů přímo u výrobců surovin, málo pravděpodobné u velkodistributorů. Existují hypotézy, že někteří výrobci sportovní výživy (například v USA) přidávají do svých přípravků vědomě steroidy.

5) Výrobce či dovozce nemá možnost kontroly surovin, nebo finálního výrobku v České ani Slovenské republice na přítomnost steroidů. Není kam se oficiálně obrátit. Určitá možnost je u zahraničních laboratoří, ale vysoká cena analýzy a relativně dlouhá doba rozborů je limitujícím faktorem pro rutinní kontrolu doplňků stravy.

6) Teoreticky je možné, že si postižený sportovec uměle vytvoří kontaminovaný doplněk, kterým se bude hájit. Domnívám se, že protistrana má dostatečné možnosti, aby podvod odhalila!

Závěr

Příznivci sportovní-doplňkové výživy, neklesejte na mysli a nežijte s pocitem, že většina doplňků stravy je kontaminována. Pro výrobce i dovozce potravních doplňků to jistě není příjemná situace, protože stín pochybností může padnout na ostatní firmy. Ty, které nabízí doplňky stravy si bezesporu poradí, aby k podobným případům nedocházelo.
Musím se přiznat, že nemám žádnou radost z výše uvedeného článku. Jsem výrobcem a dovozcem doplňků stravy a objektivně musím napsat, že něco podobného se může stát komukoliv, teoreticky i nám. Proto jsem vytvořil systém aktivní ochrany - kontroly před nákupem „rizikových surovin“. A ostatní firmy to jistě dělají podobně.

Dodatek autora článku

Bohužel mám nepřímý podíl v případu Aminostar versus sportovec Novák. Právník, který zastupoval pana Nováka při disciplinárním řízení i při soudu, je stejný právník, který zastupoval hokejový svaz při kauze hokejisty Vyhlídala. Stál na druhém břehu tohoto případu.
Michal Vyhlídal měl pozitivní test na konci roku 2002 na 19-norandrosteron. Michala jsem „zastupoval“ společně s jeho právníkem a obhajoval na všech stupních (disciplinární řízení, arbitrážní soud). Prokázal jsem, že výrobek, který užíval byl kontaminován hormony, prohormony. Myslíte, že právník za hokejový svaz aspoň trochu akceptoval naše důkazy a smiloval se nad nešťastným sportovcem, ani náhodou. Jen využil mé kompletní obhajovací zprávy, analýz z belgické antidopingové laboratoře, kontaktů, adres a vzhůru do sporu a obhajovat jiného sportovce. Samozřejmě proč ne! Není to ironie, právník ve stejných kauzách a má naprosto diametrálně odlišné nekompromisní hodnocení a vystupování. To zkrátka nechápu.
Tvrdím, že nebýt případu Vyhlídal, nebyl by ani případ Novák. Proč? Protože by se jistě pan Novák obhajoval ihned při disciplinárním řízení a zaslal doplňky výživy podstatně dříve na rozbor. Neměl on i jeho právník šajn o tom, že mohou být některé potravní doplňky kontaminovány hormony. Proto poslal doplňky stravy po více jak roce do stejné laboratoře, teprve když se rozjela kauza Vyhlídal. Vypadá to, že vystupuji proti panu Novákovi, to vůbec ne, ale ten právník nás neuvěřitelně naštval.

Synonyma

Potravina určená pro zvláštní výživu - nutraceutika, doplňky stravy, potravní doplňky, suplementy, dietní přípravky, doplňky výživy, dietary supplements, food suplements,

Anabolicko-androgenní steroidy - anabolické steroidy, steroidy, hormony, prohormony, 19-norsteroidy, 19-norprohormony, androgeny

GC- MS - spojení plynové chromatografie a hmotnostní spektrometrie

LC-MS - kapalinová chromatografie s hmotnostním detektorem

LC-MS/MS - kapalinová chromatografie ve spojení s tandemovou hmotnostní spektrometrií

GCxGC-TOF MS - ortogonální dvourozměrná plynová chromatografie s hmotnostně selektivní detekcí typu time-of-flight. Zjednodušeně, jedná se o propojení dvou plynových chromatografů v kombinaci s hmotnostním spektrometrem TOF-MS, nazývaným průletovým, přeletovým analyzátorem. Značným způsobem se zlepšuje separace a identifikace hledaných látek.